当前位置: 主页 > www.365355.com >

外泌体的分离和鉴定

发布者:365bet娱乐
来源:365bet电子游戏 日期:2019-08-30 11:54 浏览()
超速离心是最常用的外泌体纯化方法。根据研究,大约56%的人使用这种方法。这被称为当前的标准外泌体分离方法。
可以交替使用低速离心和高速离心(如图1所示)以分离相似尺寸的囊泡颗粒。
超解离的方法因其操作简单并且获得大量囊泡而广泛存在。
通过一系列基于一系列外泌体的研究,大多数高级期刊使用超速离心法,由法国居里实验室研究。
虽然这种方法看起来简单,技术含量不断提高,但我们公司正致力于超速离心的开发和优化,并在该领域积累了一些沉淀物。有。
原理:首先,低速离心去除凋亡细胞和碎片,然后高速离心去除大囊泡。最后,丢弃含有杂蛋白的上清液(如下所示)并超速离心以沉淀小的细胞外囊泡。
在外泌体中,外泌体鉴定是分离后的另一个重要步骤。
孤立的外泌体是否具有更典型的外泌体结构?
你表达特定的外泌体表面标记?
尺寸是否在外泌体的正常粒径范围内?
这些都是外泌体研究人员应该考虑的问题。
一般而言,研究人员使用各种检测方法完成分离,如外泌体透射电子显微镜,外泌体大小分析(NTA)和表面标记蛋白。蛋白质印迹是一项非常重要的技术,是外泌体表征的金标准。
透射电子显微镜
透射电子显微镜在形态和大小方面识别外泌体。
通过负染色的大量增加直接观察单个外泌体的形态结构和大小。
测试设备:透射电子显微镜(TEM,JEOL-JEM1400)
检测原理:透射电子显微镜投射聚焦在非常薄的样品上的加速电子束。
电子与样品中的原子碰撞以产生立体角散射。
因为散射角的大小与样品的密度和厚度有关,所以形成具有不同亮度和暗度的图像。
图像被放大,聚焦并显示在成像器上以供查看。
De Broglie的电子波长非常短,分辨率达到纳米级,因此非常适合外泌体结构和形态。
结果如下。